桑格测序

服务名称、说明、价格、备注(注:非英国客户支付价目表价格加10%):

RES SANGER测序TIER 1.1，测序仅，1-16个样品，$3.40，每个样品

RES SANGER测序TIER 1.2，仅测序，17-96个样品，$50.00，单价/盘

RES SANGER SEQUENCIN TIER 2.1，反应清理和测序，1-16个样品，4.22美元，每个样品

RES SANGER SEQUENCIN TIER 2.3，反应清理和测序，17-96个样品，55.00美元，单价/盘/每个反应

RES SANGER SEQUENCIN TIER 3.1，测序反应设置，清理和测序，1-20个样品，9.94美元，每个样品

RES SANGER测序TIER 3.3，测序反应设置，清理和测序，21-60个样品，162.83美元，所有单元的统一价格

RES SANGER SEQUENCING TIER 3.4，测序反应设置，清理和测序，61-94个样品，$195.00，单价/盘/每个反应

RES SANGER测序TIER 3.5，与TIER 3.3相同+额外引物，162.83美元，另加6美元/引物

RES SANGER测序TIER 3.6，与TIER 3.4相同+额外底漆，195美元，另加6美元/底漆

RES附加引物，每个附加引物用于测序，$6.00，每个引物

RES PCR纯化，单个样品的PCR产物纯化(清除):磁珠，1.59美元，每个样品

RES酶促PCR纯化，PCR产物纯化:酶促清除，3.31美元，每个样品

RES PCR纯化孔板，孔板PCR清洗:磁珠，$149.46，每板

RES外部客户收费10%，非英国客户支付目录价格加10%。，变化，每笔交易

样本数量:

• 小于21:可在微移管中提交。管应清楚地标明首字母和样品编号(如。AB1, AB2, AB3等)。
• 超过21个样品:必须在96孔板中提交。A01和B01井应该是空的。板应按列装，即先填C01至H01，再填A02至H02，再填A03至H03，等等。

DNA模板:模板应溶解在缺乏EDTA的洗脱缓冲液中。或者，可以使用含有0.1 mM EDTA的改良TE缓冲器。

• 质粒DNA:应以20-200 ng/µl的浓度供应。每个测序反应通常使用20 - 100 ng。
• PCR产物:应以4- 20ng /µl的浓度供应。通常每个测序反应使用10 50ng。PCR产物必须在循环测序前进行纯化，以去除多余的引物和酶。这项服务可以由UKHC基因组学核心实验室提供。
• Cosmids和Fosmids:应以200 ng/µl的最低浓度供应。每个测序反应需要1µg fosmid/cosmid模板。

引物

• UKHC基因组学中心拥有大量的标准引物(见引物列表)。如果需要模板专用引物，则应提供5-10 μ M浓度的引物。
• 注:UKHC基因组中心在每个测序反应中使用3.2 pmol引物。

完成的测序反应

• 如果客户已经进行了测序反应，并且仅供RUN使用，最好将样品作为干颗粒提交(如果已使用乙醇沉淀来清理测序反应)。
• 如果已经执行了另一种清理方法，我们可以将Hi-Di甲酰胺添加到最终浓度的25%。

序列反应清除

乙醇/EDTA沉淀(10µl反应体积)

• 从热循环器中取出96孔ABI板，并以1000转/分的速度脉冲旋转。
• 在每个孔中加入2.5 μ l 125 mM EDTA。
• 在每个孔中加入30ul 100%乙醇。
• 用板封密封严密;通过逆4X进行混合。
• 室温下孵育15分钟
• 离心4000rpm (3000rcf) 15分钟，4°。
• 立即*倒出乙醇上清，快速反转并轻轻摇晃。
• 在每个孔中加入30 μ l 70%的乙醇，以3000 rpm (1690 rcf)在4°下离心15分钟。
• 立即*倒掉上清液，倒置在三折纸巾上。
• 放入离心机(倒放在纸巾上)，脉冲旋转至200转/分以去除多余的乙醇。(转速为150rpm时停止旋转，因为脉冲停止后机器将继续短暂加速-不要允许转速超过500rpm。)
• 样品板(右侧朝上)在遮光罩下在黑暗中干燥1小时。

*否则再旋转2分钟。

如果您不能立即将样品送到UKHC基因组中心或投递箱，请将样品密封并在-20°下作为干颗粒储存